（1） 10μg/ml 秋水仙素;2. 實(shí)驗(yàn)方法
（2）0.075M 低滲液： 2.795 KCl + 500ml 蒸餾水
（3） 固定液 ——甲醇：冰醋酸=3:1（該試劑必需現(xiàn)配現(xiàn)用）
（1） 當(dāng)細(xì)胞系的融合達(dá)到約75-90%時(shí)，于每5ml 的培養(yǎng)基細(xì)胞中加入25-50μl 秋水仙素，繼續(xù)培養(yǎng)30min 至2 h（培養(yǎng)時(shí)間決定于細(xì)胞的生長速度及不同種細(xì)胞系間的差異）；
（2） 按照常規(guī)的方法用胰蛋白酶進(jìn)行細(xì)胞的消化；
（3） 將低滲液于37℃水浴中預(yù)熱；
（4）低滲：加入10ml 0.075MKCl 溶液，用力吹打散開，吹打100 次，37℃水浴低滲15 分鐘。
（5）預(yù)固定：加1.5ml固定液并用吸管輕輕吹勻，進(jìn)行預(yù)固定10分鐘。
（6）離心：2000rpm 離心5 分鐘，棄上清液。
（7）固定I：沿管壁慢慢加入固定液6ml，用吸管吹打成細(xì)胞懸液后，37℃水浴20 分鐘。
（8）離心：1000rpm 離心10 分鐘，棄上清液。
（9）固定II：同固定I。
（10）離心同步驟9，離心去上清后，、加0.3-0.5ml 固定液，吸管吹打成細(xì)胞懸液。（11）滴片：用吸管取細(xì)胞懸液，高度30-40 cm，滴在預(yù)冷的載玻片上，室溫晾干，然后90℃烤箱烤片0.5 小時(shí)。
