活細(xì)胞紅色熒光示蹤探針
（1）產(chǎn)品內(nèi)容：
名稱：活細(xì)胞染色示蹤-紅色，貨號：CM1912 規(guī)格：0.1ml
（2）檢測原理：
PKH26是一種脂溶性熒光染料，能插入細(xì)胞膜的脂質(zhì)分子牢固結(jié)合，用于標(biāo)記活細(xì)胞的膜結(jié)構(gòu)。在細(xì)胞分裂時，PKH26熒光會平均分配到兩個子細(xì)胞; 熒光強度會隨著分裂次數(shù)而遞減。PKH26標(biāo)記的細(xì)胞具有高穩(wěn)定性和低毒性，適用于體外和體內(nèi)長期示蹤實驗。與CFSE類似（綠色熒光），PKH26紅色熒光。
（3）具體應(yīng)用：
流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞的增殖分裂，細(xì)胞染色后的示蹤或追蹤，細(xì)胞的相互作用（綠色/紅色）。
（4）試劑盒特點與保存條件
Ø 所有試劑2-6℃保存; 試劑盒在有效期內(nèi)的穩(wěn)定。不要使用已經(jīng)過期的試劑;
Ø 用前，將試劑恢復(fù)至室溫（20-25℃），探針溶液必須混勻; 應(yīng)帶手套操作，使用新鮮二甲苯乙醇溶液
Ø 試劑PKH26濃度：2.5μM， 0.1ml， 1000×。
（4）檢測步驟
Ø 在室溫或37℃下，用PBS稀釋（1:1000比例）的染料，通過渦旋混勻即可。比如配制1ml溶液（利用PBS，1:1000稀釋原液）。
Ø 將其與離心沉淀的細(xì)胞一起，37℃孵育15-20分鐘，再在2-8℃放置15分鐘，離心細(xì)胞，PBS洗滌去除染料工作溶液，根據(jù)具體實驗，繼續(xù)培養(yǎng)或與其他細(xì)胞混合觀察或?qū)⑷旧募?xì)胞與其他細(xì)胞共培養(yǎng)，避光。根據(jù)實際情況培養(yǎng)一段時間，一般不超過10天。
Ø 洗滌后，使用激發(fā)波長為 550nm，發(fā)射波長565nm（FL1或FITC通道）的流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡進(jìn)行分析。
注意：使用原液;將任何剩余的溶液等分存于-20℃。避免反復(fù)凍融循環(huán)，避免光照。
活細(xì)胞綠色熒光示蹤探針
（1）產(chǎn)品內(nèi)容：
名稱：活細(xì)胞染色液示蹤或分裂增殖探針，貨號：CM1911 規(guī)格：0.1ml
（2）檢測原理：
活細(xì)胞熒光示蹤探針CFSE，可以應(yīng)用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測熒光染色，分析異質(zhì)細(xì)胞群的有力工具。在所有現(xiàn)有的熒光染料中，CFSE是非熒光分子，其擴(kuò)散到細(xì)胞中并被細(xì)胞內(nèi)非特異性酯酶水解以產(chǎn)生熒光產(chǎn)物。熒光產(chǎn)物僅在具有完整細(xì)胞膜和活性酯酶活性的細(xì)胞中產(chǎn)生，而死細(xì)胞不被染色。能追蹤細(xì)胞的去向和分裂，其熒光被檢測的時間大約持續(xù)10-12天左右，熒光強度隨細(xì)胞分裂而減少。
（3）具體應(yīng)用：
流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞的增殖分裂，細(xì)胞染色后的示蹤或追蹤。
（4）試劑盒特點與保存條件
Ø 所有試劑2-6℃保存; 試劑盒在有效期內(nèi)的穩(wěn)定。不要使用已經(jīng)過期的試劑;
Ø 用前，將試劑恢復(fù)至室溫（20-25℃），探針溶液必須混勻; 應(yīng)帶手套操作，使用新鮮二甲苯乙醇溶液
Ø 試劑CFSE濃度，：2.5μM， 0.1ml， 1000X。
（5）檢測步驟
Ø 在室溫或37℃下，用PBS稀釋（1:1000比例）的染料，通過渦旋混勻即可。比如配制1ml溶液（利用PBS，1:1000稀釋原液）。
Ø 將其與細(xì)胞一起孵育10到30分鐘，PBS洗滌去除染料工作溶液，根據(jù)具體實驗，與其他細(xì)胞混合觀察，或者，將染色的細(xì)胞與其他細(xì)胞共培養(yǎng)，避光。根據(jù)實際情況培養(yǎng)一段時間，一般不超過10天。
Ø 洗滌后，使用激發(fā)波長為 490左右（FL1或FITC通道）的流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡進(jìn)行分析。
注意：使用原液;將任何剩余的溶液等分存于-20℃。避免反復(fù)凍融循環(huán)，避免光照。
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