E-Vison鼠/兔通用HRP二抗免疫組化顯色試劑盒

貨號：EM-P002   100T

* 免疫組化顯色試劑盒簡介：

本試劑盒是特異性強(qiáng)敏感度高的敏二步法免疫組化試劑盒，適合與兔抗體、小鼠抗體結(jié)合。試劑1是標(biāo)記有辣根過氧化物酶的和抗兔抗小鼠抗體多聚體復(fù)合物分子，即復(fù)合體二抗。與兔抗或鼠抗一抗結(jié)合。結(jié)合后辣根過氧化物酶被標(biāo)記在組織上，再與DAB反應(yīng)，得到棕色顯色。本試劑不受內(nèi)源型生物素干擾。染色背景非常清晰。實(shí)驗盒步驟少，操作簡單，背景低特點(diǎn)。

* 產(chǎn)品應(yīng)用前準(zhǔn)備：

1)常規(guī)脫蠟：將石蠟切片浸于二甲苯：5分鐘，三次。再置于100％無水乙醇中3分鐘兩次；再分別置入90%與75%酒精，各3分鐘。用PBS浸泡2次，每次3分鐘。

2)抗原修復(fù)：用EDTA修復(fù)液或者其他合適修復(fù)液，修復(fù)12分鐘-20分鐘，或一抗說明書進(jìn)行修復(fù)。

3)DAB工作液的配制：實(shí)驗前10分鐘，按20:1的比例稀釋顯色緩沖液和DAB顯色劑，混勻避光備用。

* 實(shí)驗步驟：

1）取出切片，甩掉并擦干切片上的液體，放于濕盒中，滴加3%過氧化氫阻斷內(nèi)源性過氧物化酶。避光孵育10-15分鐘。用PBS浸泡3次，每次3分鐘。取出切片，甩干組織上液體，備用。

2）滴加50µl一抗（兔抗或小鼠抗）工作液于組織上，室溫孵育30-60分鐘或4℃過夜（效果好）。 用PBS沖洗切片，3次，每次3分鐘，取出切片，甩干組織上液體（勿干燥），備用。

3）滴加50µL鼠兔通用HRP二抗于組織上，室溫孵育30-50分鐘。將切片放入PBS緩沖液中，洗3次，每次3分鐘，取出切片，甩干組織液體，勿干燥，平放于濕盒中備用。

4）滴加前面配制的顯色劑DAB工作液50-100µl，室溫孵育5-15分鐘，或光鏡下控制顯色過程。棕色顯色完全后，蒸餾水沖洗終止顯色，部分微量陽性細(xì)胞的需要油鏡鏡下觀察。

5）蘇木精復(fù)染：70%酒精、95%或100%酒精，浸泡3分鐘。取出切片，置入二甲苯5分鐘，2次。

6）用中性封片膠封。

*  產(chǎn)品保存與注意事項：

1）保存于條件2-8℃，切勿反復(fù)凍融。

2）抗原修復(fù)后的過程，免疫組化染色過程中盡可能

避免組織片干燥，否則易出現(xiàn)背景假陽性。

3）獲得良好染色效果主要在于抗原修復(fù)、廠家的一抗，建議設(shè)置陰陽性對照，比如Ki67等。

4）在使用本公司提供的操作方法遇到困難，請聯(lián)系我們。

僅供研究，不用于臨床診斷,上圖是P63抗體效果圖，診斷試劑另行聯(lián)系我們。

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