組織原位ALP染色試劑盒
貨號（Cat.）：CB2307 保存（Store）：避光，-20℃ 規(guī)格：100T 價格：300元
原理介紹：
堿性磷酸酶(ALP)在哺乳動物中主要存在于肝臟、骨骼和腎臟。成骨細胞能夠分泌堿性磷酸酶，是骨形成所必需的酶，是成骨細胞分化和功能成熟的早期標志。了解骨代謝狀態(tài)是研究細胞生理活性的一個有效方法。對ALP染色后可了解成骨細胞的骨形成情況，其原理是采用偶氮偶聯(lián)法，在pH9.2~9.8的堿性條件下，細胞內(nèi)堿性磷酸酶可使AS-BI磷酸鹽水解，釋放出的磷酸萘酚，不偶聯(lián)重氮鹽生成有色產(chǎn)物，定位于細胞質(zhì)中。
適用于：骨細胞涂片、骨組織冰凍切片、骨組織石碏切片等，觀察成骨細胞的染色結(jié)果，檢查細胞的分化狀態(tài)和骨組織的分布情況。僅供研究，不得用于診斷。
試劑盒組分：
1.核染色試劑··············10 mL（用核染色試劑使各種細胞核呈藍綠色。）
2.堿性磷酸酶預(yù)混物溶液····30 mL（ALP染色劑使成骨細胞的細胞膜、軟骨細胞和細胞間膜呈茶褐色）
樣品前期處理：
注：ALP染色使用不能用福爾馬林固定的新鮮材料，如果未在短時間內(nèi)固定，會導(dǎo)致酶失活，因此推薦80%乙醇固定。ALP酶是含有金屬Zn蛋白。通過脫鈣處理，酶的組成成分Zn被去除，導(dǎo)致酶失活。為彌補此缺點，需要添加ZnSO4，作為ALP活化劑，也可嘗試添加相同螯合劑EDTA溶液，染色結(jié)果會更好。
實驗步驟：
材料獲取→固定→脫脂脫鈣→脫水、包埋→切片、干燥→染色、封片→鏡檢。
陽性結(jié)果判斷：ALP的活性部位呈藍色或茶褐色；ALP酶活性染色使用的是預(yù)混物溶液，簡單適用，骨組織切片（脫鈣GMA樹脂包埋切片）或培養(yǎng)的細胞。
組織原位TRAP染色試劑盒
貨號（Cat.）：CB2308 保存（Store）：避光，-20℃ 規(guī)格：100T 300元
產(chǎn)品原理介紹：
抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）為破骨細胞的特異性標志酶，只出現(xiàn)在特異性細胞中,主要用于檢測骨、骨細胞中破骨細胞的染色，破骨細胞呈紅色，細胞核淺藍色。TRAP分布廣，遍布各種組織，存在于細胞的溶酶體內(nèi)，溶酶體標志酶。pH為4.5～5.5。血液中的TRAP絕大多數(shù)來源于破骨細胞，通過測量血液中的TRAP了解破骨細胞的功能狀態(tài)。當?shù)孜镏写嬖诰剖釙r，細胞內(nèi)抗酒石酸酸性磷酸酶催化底物水解，生成不溶性的偶氮染料沉淀，用TRAP染色劑使破骨細胞呈紅色，可檢查細胞的分化狀態(tài)和骨組織的分布情況。
適用于：新鮮血涂片、細胞涂片，亦可用于冰凍切片、石蠟切片等。本染色試劑盒適用于生物或藥物研究。僅供研究，不得用于診斷。
試劑盒組分：
1.酒石酸溶液（×10）·······3 mL
2. 酸性磷酸酶底物液A······30 mL
3. 酸性磷酸酶底物液B······3 mL
4. 核染色試劑··············10 mL（用核染色試劑使各種細胞核呈藍綠色。）
樣品前期處理：
實驗步驟：
材料獲取→固定→脫脂脫鈣→脫水、包埋→切片、干燥→染色、封片→鏡檢
結(jié)果判斷：以萘酚二磷酸鹽為底物，偶氮副品紅為顯色劑，TRAP在酒石酸鉀鈉存在條件下將萘酚AS-BI磷酸鹽水解為萘酚AS-BI，與顯色劑結(jié)合形成紅色沉淀,定位于細胞質(zhì)中，若細胞內(nèi)的ACP有抗酒石酸的活性，則呈陽性反應(yīng)。
